Evaluación de inhibidores de cinasas aprobadas por la FDA como potenciales antivirales contra el virus Mayaro

Zegarra Ledezma, Dalel Issa (2024) Evaluación de inhibidores de cinasas aprobadas por la FDA como potenciales antivirales contra el virus Mayaro. Masters thesis, Universidad de Panamá. Vicerrectoría de Investigación y Postgrado.

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Abstract

El virus Mayaro (MAYV) es un arbovirus emergente transmitido principalmente por mosquitos silvestres del género Haemagogus. El MAYV, como otros virus, manipula y secuestra la maquinaria celular para replicarse con éxito. Numerosos informes indican que la actividad de las cinasas es esencial en diferentes etapas del ciclo de vida viral. Las cinasas son enzimas que catalizan la fosforilación de varios sustratos, controlando funciones celulares esenciales, como el metabolismo, el ciclo celular, la inflamación y la transducción de señales, entre otras. Una estrategia emergente para identificar posibles tratamientos antivirales consiste en reutilizar fármacos ya aprobados para el tratamiento de diversas enfermedades crónicas. Este enfoque presenta varias ventajas; al existir estudios previos de toxicidad, dosificación y farmacocinética, se acortan los plazos para la aplicación clínica del fármaco y se reducen los costes de desarrollo. Así pues, el objetivo del presente estudio fue evaluar la posible actividad antiviral de una serie de inhibidores de cinasas aprobados por la FDA para el tratamiento del cáncer y otras patologías. En primer lugar, evaluamos la toxicidad de 20 inhibidores de cinasas en células HeLa mediante el método MTT, donde el 25% resulto ser tóxico en células HeLa por lo que fueron excluidos del estudio. A continuación, se cuantificó la producción de partículas de MAYV en sobrenadantes celulares de células HeLa infectadas mediante un ensayo de formación de placas. Aquellos inhibidores que presentaron actividad antiviral en el análisis inicial (87%), se validaron en la línea celular humana primaria HDFs. En HDFs con excepción de Bosutinib, los demás inhibidores bloquean la actividad de una o más isoformas del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Por lo tanto, nos enfocamos en este grupo de compuestos: Afatinib, Gefitnib, Lapatinib, Osimertinib y Tucatinib, para caracterizar su efecto sobre MAYV. Además, se evaluaron otros virus tales como, ZIKV, CHIKV, VSV, IAV y HCMV. Se realizaron ensayos de tiempos de adición en HDFs infectados con MAYV y tratados con inhibidores del EGFR. La expresión de proteínas virales en los HDFs tratados o no tratados con inhibidores del EGFR, se evaluó mediante Western blot. Los inhibidores del EGFR fueron bien tolerados en dosis que oscilaron entre 2,5 y 10 μM en células HeLa, HDFs, A549 e IMR90. Todos los inhibidores del EGFR redujeron el rendimiento de la progenie MAYV en células HeLa y HDF, y este efecto fue dosis-dependiente. Los ensayos de adición revelaron que los inhibidores de EGFR eran capaces de bloquear la replicación de MAYV hasta 4 h después del inicio de la infección. Además, los inhibidores del EGFR también reducen la producción de progenie de CHIKV, ZIKV VSV, IAV y HCMV. Por último, los inhibidores del EGFR reducen la expresión de las proteínas virales de MAYV, CHIKV, VSV, IAV, VAVC y HCMV. En conjunto, nuestros datos sugieren que el EGFR es una posible diana para combatir diferentes arbovirus y aportan pruebas de que los fármacos contra el cáncer aprobados por la FDA pueden reutilizarse como tratamientos antivirales.

Item Type:	Thesis (Masters)
Uncontrolled Keywords:	MAYV, antivirales, cinasas, arbovirus, reutilización.
Subjects:	Q Science > Q Science (General) Q Science > QR Microbiology Q Science > QR Microbiology > QR355 Virology
Depositing User:	Yovani Olmedo
Date Deposited:	16 Mar 2026 12:52
Last Modified:	16 Mar 2026 12:52
URI:	http://up-rid.up.ac.pa/id/eprint/10210

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